RIDASCREEN Астровирус

Назначение

Тест RIDASCREEN® Астровирус (RIDASCREEN® Astrovirus) – диагностическая in vitro тест-система для выявления антигена Astrovirus в образцах кала. 

Введение

Астровирусы были описаны Appleton и Higgins в 1975 году и названы впоследствии (за свою звездчатуюформу) Madeley и Cosgrove, использовавшими электронный микроскоп для идентификации этих маленьких шарообразных вирусов в образцах кала детей, страдающих диареей. Эти вирусы, наравне с калицивирусами и некоторыми другими, относятся к группе так называемых Маленьких шарообразных структурированных вирусов (SRSVs), которые, из-за их явно структурированной поверхности, отличны от группы Маленьких шарообразных вирусов (SRV), имеющих гладкую неструктурированную поверхность. В группу SRV также входят среди прочих парвовирусы и пикорнавирусы. Эпидемиологическое значение форм гастроэнтеритов, вызванных Astrovirus, было совершенно неясно в то время, когда для их идентификации использовали только электронную микроскопию (ЭМ). Поэтому случаи диареи и диареи, сопровождавшейся рвотой, вызванные Astrovirus, совершенно недооценивались. Одной из причин этого является относительно низкая чувствительность ЭМ, другой – то, что не всегда можно четко различить частицы SRV. Низкая частота встречаемости 1% не всегда согласуется с данными, полученными серо-диагностическими методами, согласно которым до 70% детей старшего школьного возраста и молодых взрослых людей обладают антителами, специфичными к Astrovirus. Лишь с тех пор, как стали доступными современные методы исследования, такие как иммуноферментный анализ, в 10 – 100 раз более чувствительный, чем ЭМ, и очень чувствительный метод ПЦР, предел определения которого 102 частиц на мл образца кала, были оценены важность и вклад Astrovirus в развитие диареи, стала возможна дифференциальная диагностика заболеваний, сопровождающихся диареей. В настоящее время частота встречаемости Astrovirus в случаях острой диареи составляет 2,5 - 10%, как и у аденовирусов (тип 40/41). И, таким образом, занимает второе место после ротавирусов в качестве этиологического фактора небактериальных гастроэнтеритов. Среди 7 серотипов, известных к настоящему времени, особую значимость представляют 1 - 5. Гастроэнтериты, вызванные Astrovirus, наблюдаются во всех возрастных группах. Однако наиболее часто ими болеют дети и пожилые люди. Особенно часто вспышки этого заболевания отмечаются в детских садах, школах, больницах и домах престарелых. Но гастроэнтериты, вызванные астровирусами, спонтанно появляются и в группах призывников, и в туристических группах. Инфицирование, как и в случае ротавирусов, происходит при употреблении зараженной пищи, особенно устриц, через воду и фекально-оральным способом. Благодаря использованию высокоспецифичных моноклональных антител иммуноферментная тест-система RIDASCREEN® Astrovirus позволяет надежно идентифицировать антигены Astrovirus в разведенных образцах кала. 

Принцип метода

Тест RIDASCREEN® Астровирус основан на твердофазном «сэндвич» методе иммуноферментного анализа (ИФА). В тесте используются высокоспецифичные антитела. На поверхности лунок планшета сорбированы специфичные моноклональные (мышиные) антитела ко всем известным серотипам Astrovirus. В лунки вносят суспензии образцов кала и контроли. После промывки добавляют антитела к антигенам серотипов Astrovirus, конъюгированные с пероксидазой хрена и инкубируют при комнатной температуре (20 - 25°С). В результате одновременной инкубации образуется «сэндвич», в котором антиген Astrovirus оказывается между антителами твердой фазы и антителами, мечеными ферментом. Затем лунки отмывают для удаления несвязавшихся меченых антител. После добавления субстрата в лунках с положительными образцами, благодаря активности пероксидазы, развивается цветная реакция. При добавлении стоп-реагента реакция прекращается, и содержимое лунки изменяет цвет с голубого на желтый. Оптическую плотность измеряют при длине волны 450 нм (оптимальное значение референтной длины волны > 600 нм). Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации антигена в образце. 

Справка ВНИИС

Наборы реагентов для иммунологических исследований (справка ВНИИС) (PDF, 354 Кб)