Инсулин, ультрачувствительный // Ultrasensitive Insulin ELISA
Назначение
Тест Mercodia Ultrasensitive Insulin ELISA предназначен для количественного определения инсулина в сыворотке и плазме крови.
Введение
Инсулин является основным гормоном, контролирующим метаболизм глюкозы. Он синтезируется в β- клетках островков Лангерганса в виде предшественника, проинсулина, из которого при расщеплении образуется С-пептид и инсулин. И тот и другой секретируются в эквимолярных количествах в портальный кровоток. Молекула инсулина состоит из двух полипептидных цепей - А-цепи и В-цепи (21 и 30 аминокислотных остатков, соответственно). Обе цепи связаны между собой двумя межцепочечными дисульфидными мостиками. Внутри А-цепи также имеется один дисульфидный мостик. Секреция инсулина контролируется в основном концентрацией глюкозы в плазме; гормон оказывает множество метаболических эффектов. Основная функция инсулина – регуляция поступления и утилизации глюкозы в периферических тканях, эта функция осуществляется с помощью специальных белков- переносчиков глюкозы. Этой и другим гипогликемическим активностям инсулина, таким как ингибирование глюконеогенеза и глюкогенолиза в печени, противодействуют эффекты гипергликемических гормонов, включая глюкагон, эпинефрин (адреналин), гормон роста и кортизол. Концентрация инсулина значительно снижена при инсулинзависимом сахарном диабете (IDDM) и при некоторых других состояниях, таких как гипопитуитаризм. Уровень инсулина возрастает при инсулиннезависимом сахарном диабете (NIDDM), ожирении, инсулиноме и некоторых эндокринных дисфункциях, таких как синдром Кушинга и акромегалия.
Принцип метода
Тест Ultrasensitive Insulin ELISA представляет собой твердофазный двухстадийный иммуноферментный анализ. В основе метода лежит прямой “сэндвич”-ИФА, в котором два вида моноклональных антител направлены на различные антигенные детерминанты молекулы инсулина. Во время инкубации присутствующий в образце инсулин реагирует с антителами к инсулину, конъюгированными с пероксидазой хрена, и одновременно - с антителами к инсулину, иммобилизированными в лунках микропланшета. Промывка удаляет не связавшиеся антитела, меченные ферментом. Детекцию связавшегося конъюгата осуществляют по его реакции с ферментным субстратом 3,3’,5,5’-тетраметилбензидином. Реакцию останавливают добавлением кислоты, чтобы получить колориметрическую конечную точку для измерения оптической плотности (ОП) на спектрофотометре.
Регистрационное удостоверение
Инструкция
10-1132-01 Инсулин ультрачувствительный (Ultrasensitive Insulin ELISA) (PDF, 252 Кб)
(Производитель может вносить изменения в инструкцию по применению. За версией инструкции для конкретного лота диагностического набора/реагента обращайтесь в отдел продукции ЗАО "Аналитика")